The present research was undertaken in order to study the effect of repeated low doses of radiation on two different cell lines from the same species. An in vitro model test was developed to avoid the influence of the confounding factors affecting epidemiological studies and to simulate a chronic exposure (50 mSv of x-rays during ten consecutive days). Comet assay and early apoptosis were analyzed immediately after exposure and after chronic irradiation. Sequential irradiation induced an increase of cells showing DNA damage. Index Damage was higher than that of the controls in both cell lines immediately after exposure and after chronic irradiation. These differences between exposed and control cells were statistically significant only for the transformed cell line after chronic irradiation (p<0.001). Significantly higher levels of apoptosis were scored after chronic exposure in both cells lines (p<0.001). The induction of DNA damage and apoptosis in hamster cells by chronic exposure to low dose ionizing radiation was demonstrated. Cell types reacted differently to chronic exposure. Though further investigation is needed to understand the mechanisms of radiation effects on chronic low-dose-exposed cell populations, cellular type should be taken into account in the design of in vitro experiments to understand low-dose-irradiation effects.

El presente trabajo fue realizado con el fin de estudiar el efecto de dosis bajas y repetidas de radiación sobre dos líneas celulares de la misma especie. Se desarrolló un modelo in vitro para evitar la influencia de los factores de confusión que afectan a los estudios epidemiológicos y para simular una exposición crónica. Las técnicas utilizadas fueron el ensayo cometa y el análisis de apoptosis temprana; estas se llevaron a cabo inmediatamente después de la exposición y luego de la irradiación crónica. La irradiación secuencial indujo un aumento de células con daño en el ADN. El índice de daño fue mayor que el de los controles en ambas líneas celulares, tanto inmediatamente después de la exposición como luego de la irradiación crónica. Este aumento fue estadísticamente significativo solamente para la línea celular transformada luego de la irradiación crónica (p<0,001). El análisis de apoptosis arrojó niveles significativamente mayores al control para ambas líneas celulares luego de la exposición crónica (p<0.001). Se demostró que la exposición crónica a radiación ionizante de dosis bajas indujo daño en el ADN y apoptosis en células de hámster chino cultivadas in vitro. Las respuestas de ambos tipos celulares fueron algo diferentes. Evidentemente, el tipo celular debe ser tenido en cuenta a la hora de diseñar experimentos in vitro para entender los efectos de la radiación crónica de dosis baja en las poblaciones celulares.

Cattle was absent from America before the discovery. Initially, bovine were brought to Greater Antilles (La Española, Puerto Rico, Jamaica and Cuba islands), and in the course of a few years, they were taken from Caribbean islands to the rest of Latin America. Nowadays, Cuban Creole cattle population is about 1300 heads, mainly located in the eastern region of the island. With the aim of analyzing the maternal origin of Cuban Creole cattle and detect possible contemporaneous, male mediated, gene flow, a 240 pb fragment of mitochondrial D-loop (mtDNA) and five microsatellites of Y chromosome (BTY) were studied in 36 dams and 21 sires, respectively. Genetic diversity was evaluated through number of haplotypes, mean number of pairwise differences and nucleotide diversity. The phylogenetic analysis was performed using a median joining. A total of 15 mtDNA haplotypes were detected in the studied population (10 from the European haplogroup T3, 3 from the African T1, 1 from the Nearern East T2, and 1 ambiguous T1-T3). The number of polymorphic sites, the mean nucleotide diversity, and the mean number of pairwise differences were 23, 0.014 and 3.36, respectively. Two patrilinages were detected, both belonging to the Y3 Zebu haplogroup. In conclusion, Cuban Creole cattle population had a mtDNA haplotypic composition similar to the observed in Creole and Mediterranean breeds, what is in concordance with its historical origin. Y chromosome analysis evidenced a male mediated process of zebu introgression.

Antes de descubrimiento, no existían bovinos en América. Los primeros, fueron introducidos en la Antillas Mayores (La Española, Puerto Rico, Jamaica y Cuba), y desde allí trasladados al resto de Latinoamérica. Actualmente, existen en Cuba alrededor de 1300 bovinos Criollos, concentrados principalmente en la región oriental. Con el objetivo de analizar el origen materno de esta raza y detectar eventos contemporáneos de flujo génico por vía paterna, se analizó un fragmento de 240 pb del D-loop mitocondrial (mtADN) y 5 microsatélites del cromosoma Y (BTY), en 36 hembras y 21 machos respectivamente. La diversidad genética se estimó mediante el número de haplotipos, el número de sitios polimórficos, el número de diferencias nucleotídicas entre pares de secuencias y el índice de diversidad nucleotídica, mientras que el análisis filogenético se realizó utilizando el método de median joining network. Dicho análisis permitió detectar 15 haplotipos mitocondriales (10 del haplogrupo europeo T3, 3 del africano T1, 1 del cercano oriente T2 y 1 ambiguo T1-T3) y 3 haplotipos en el BTY, ambos del haplogrupo cebuíno Y3. En el mtADN se detectaron 23 sitios polimórficos con una diversidad nucleotídica de 0,014 y 3,36 diferencias medias entre pares de secuencias. En conclusión, la población de bovinos Criollos Cubanos presentó una composición haplotípica mitocondrial comparable a la de otras razas criollas y mediterráneas, hecho que concuerda con su origen histórico. El BTY evidenció altos niveles de introgresion paterna de genes del zebú.

American Creole bovines and equines are direct descendant from the animals introduced by European conquerors during XV an XVI centuries. At the beginning of the last decade, new technologies based in DNA emerged for genetic analysis, and Creole breeds were not the exception for these kind of studies. During the last years, these methodologies evolved vertiginously. In a short time, the amount of available information increased, and the analysis of few loci turned into analysis of complete genomes. This work describes the evolution of Creole, cattle and equines, molecular genetic studies during the last fifteen years. Even though, Creole breeds have not entered yet into genomic and proteomic era, its study is relevant because they are suffering a progressive population reduction. In this sense, information about infectious diseases resistance, adaptability, forensic genetics, animal production and phylogeography, among others, can be obtained from them. Furthermore, Creole breeds are a unique natural reservoir of genetic variability, and strategies for its conservation should be implemented.

Los bovinos y equinos criollos americanos son descendientes directos de los animales introducidos al Nuevo Mundo por los europeos durante los siglos XV y XVI. En los comienzos de la década pasada, surgieron tecnologías basadas en el estudio del ADN que permitieron profundizar el análisis genético, por su parte, las especies criollas americanas no quedaron fuera de dichos estudios. En los últimos años, estas metodologías evolucionaron en forma vertiginosa, y en poco tiempo, el aumento de información creció significativamente de modo tal que las investigaciones pasaron de unos pocos loci a la secuenciación y el análisis de los genomas completos de ambas especies. En el presente trabajo se describe como ha evolucionado el estado del arte de la genética molecular de bovinos y equinos criollos en los últimos 15 años. Si bien las razas criollas aun no han entrado en la era de la genómica y la proteómica, su estudio es valioso dado que actualmente se encuentran en progresiva reducción poblacional. Su importancia radica en que aporta información relacionada con la resistencia a enfermedades infecciosas, la adaptabilidad ante condiciones desfavorables, la genética forense, la producción animal y la filigeografía, entre otras. Además, las razas criollas son un reservorio natural e irremplazable de variabilidad genética, y el conocimiento pormenorizado de ellas es clave para la planificación de estrategias de conservación sustentables a lo largo del tiempo.

During the last decade several reports have provided evidence on the non-targeted effects of ionizing radiation. In this study, we have analyzed the delayed DNA damage induced by ionizing radiation in MRC-5 Human fibroblasts cultured in vitro. MRC-5 cells were irradiated with 10 and 50 milligrays (mGy) and analyzed immediately after exposure, and at passages 6 and 12 post-radiation by means of comet assay, micronucleus analysis and γ-H2AX foci formation. Cytogenetic and cytomolecular damage was analysed at every sample point comparing irradiated and control cells. No significant damage differences were found among samples from all passages of treatments. Our results suggest that even at low doses, ionizing radiation could induce delayed damage. Comet assay, micronucleus analysis and γ-H2AX focus analysis showed to be useful techniques to detect DNA damage and might be also sensitive for the study of delayed events as genomic instability.

Durante la última década se ha ido acumulando evidencia acerca de los efectos no específicos de las radiaciones ionizantes. En el presente trabajo analizamos el daño inducido por radiación ionizante en el ADN de la progenie de fibroblastos humanos de la línea MRC-5 cultivados in vitro. Se irradiaron las células con 10 y 50 miligrays (mGy) y se analizaron inmediatamente después de la exposición, y en los pasajes 6 y 12 post-irradiación a través del ensayo cometa, análisis de micronucleos y conteo de focos de γ-H2AX. Se observó daño citogenético y citomolecular en todos los puntos muestrales analizados cuando comparamos las células irradiadas con las correspondientes al control negativo. No hubo diferencias significativas al comparar las muestras de cada tratamiento tomadas en los diferentes pasajes. Los resultados obtenidos sugieren que las dosis muy bajas de radiación ionizante pueden inducir daño no sólo en las células expuestas sino también en su progenie. El ensayo cometa, análisis de micronúcleos y conteo de focos de γ-H2AX son consideradas técnicas útiles para detectar daño en el ADN y según nuestros resultados, podrían emplearse para analizar eventos retrasados en el tiempo.

A fragment of 466 base pairs from a highly variable peripheral region of the mitochondrial D-loop of horses was amplified and analyzed by single stranded conformational polymorphism (SSCP). Fourteen distinct SSCP variants were detected in 100 horses belonging to four breeds (Arabian, ARB; Thoroughbred, TB; Argentinian Creole, ARC; and Peruvian Paso from Argentina, PPA). Each breed showed four to eight SSCP variants, many of which were shared between two or three of the studied breeds. Arabian horses were the most variable (eigth variants), with three variants unique to the breed. PPA and ARC showed two and one characteristic SSCP variants, respectively, while TB shared all its variants with at least one of the other breeds. An analysis based on the presence/absence of the variants revealed a closer relationship between PPA and TB, which was not completely unexpected considering the mixed ancestry of the PPA mares. The results also confirm the efficiency of SSCP to detect variability in horse mitochondrial DNA.

Data from five protein-coding loci related to dairy production were used to study the genetic diversity and population structure of Argentine and Bolivian Creole cattle breeds. Genomic DNA was extracted from blood samples of six Creole cattle breeds: Argentine (n = 230), Patagonian (n = 25); "Saavedreño" (n = 140), "Chaqueño Boliviano" (n = 30), "Yacumeño" (n = 27), and "Chusco" (n = 11). kappa-casein, beta-lactoglobulin, growth hormone and prolactin were measured by PCR-RFLP, while alphaS1-casein was typed by PCR-ASO. The results are discussed, focusing on: historical origin, recent differentiation and selection events, Zebu gene introgression, and population structure. This work shows that: (i) For the studied genes, the observed gene frequency profiles of Argentine and Bolivian Creole cattle breeds were close to the data reported for Iberian breeds and for other South-American Creole cattle breeds which are historically related; (ii) although Zebu gene introgression has been reported at the studied loci, these breeds seem to be far from the Zebu gene frequency profiles; and (iii) the Argentine and Bolivian Creole cattle showed significant levels of subdivision, but each population has maintained its degree of genetic variability.